terhadap lingkungan, aktif (mudah ditangkap) dan tidak menghasilkan racun (buffer lingkungan).
Tahapan Kultur pakan alami (phytoplankton) di Laboratorium
A. Kultur Laboratorium :
1. Kultur agar atau kultur di plate/petridish (tanpa aerasi)
kultur agar diawali dengan sterilisasi alat dan pembuatan media agar yang sudah diberi pupuk PA(Pro Analis) kemudian disterilisasi menggunakanAutoclave kemudian dituang ke petridish steril ¾ bagian. Setelah media agar membeku dilakukan inokulasi menggunakan metode gores, atau metode pipet). Phytoplankton yang ditanam biasanya akan tumbuh setelah dua minggu (tergantung species yang ditanam).
2. Kultur test tube (tanpa aerasi)
Kulturan agar yang sudah tumbuh dapat dipindahkan kekulturan testube, dengan cara media steril dipupuk dengan dosis 1m/liter. pupuk yang digunakan adalah pupuk PA . Untuk species diatom menggunakan pupuk diatom dan untuk species Chlorophyceae menggunakan pupuk Walne. Sebelum melakukan kultur terlebih dahulu diambil satu coloni dari media agar dan diberi air laut steril kemudian dicek dibawah mikroskop, apabila steril tidak ada kontaminasi maka dikultur ditest tuber. Untuk sebuah test tube diberi media air laut steril yang sudah dipupuk ¾ bagian kemudian diberi bibit satu koloni. Mikroalga akan tumbuh minimal 7 hari (seminggu)
3. Kultur erlenmeyer (tanpa aerasi)
Hasil kulturan test tube selanjutnya dapat dijadikan bibit (starter) pada kulturan erlenmeyer tanpa aerasi, disiapkan media air laut yang sudah dipupuk dengan dosis 1 ml/liter kemudian diberi bibit. Lama kulturan 6-7 hari untuk species Nannochloropsis sp dan 3-4 hari untuk species diatom.
4. Kultur erlenmeyer/ stoples 1-2 liter (aerasi)
Sterilisasi media dengan cara direbus hingga mendidih kemudian dituang ke dalam wadah dan ditutup rapat. Setelah dingin dilengkapi peralatan aerasi, dipupuk dengan dosis 1ml/liter (PA), perbandingan bibit dan media adalah 3 : 7, dipertahankan pada suhu 25 0C dan penyinaran menggunakan lampu TL 40 watt 2 buah dan inkubasi 5-7 hari
5. Kultur carboy/ stoples 10 liter (aerasi)
Sterilisasi media menggunakan kaporit 10 ppm dan dinetralkan dengan thiosulfat ≤ 5 ppm Setelah netral dipupuk dengan dosis 1ml/liter (PA), perbandingan bibit dan media adalah 3 : 7, dipertahankan pada suhu 25 C danpenyinaran menggunakan lampu TL 40 watt 2 buah dan inkubasi 5-7 hari
B. Kultur intermediate
Kultur aquarium 100 liter dan Kultur conicel 500 liter – 1 ton
Air laut disterilisi menggunakan kaporit 10 ppm dan dinetralkan dengan thiosufat 5 ppm, lama sterilisasi min 24 jam. Sebelum dilakukan pemberian bibit terlebih dahulu diberi pupuk TG (Tehnical Growth) dengan dosis 1 ml/l. Untuk species diatom menggunakan pupuk diatao (TG) kalau untuk species Chlorophyceae menggunakan pupuk Walne (TG). Perbandingan penggunaan bibit dan media adalah 3 :7. Kultur dilakukan pada ruangan semi outdoor dengan atap fiber tembus cahaya matahari Dan lama inkubasi 5-7 hari
C. Kultur massal
Bak semen 10 – 40 ton atau lebih
Bak semen untuk kultur harus dalam kondisi bersih (steril), air laut disterilisi menggunakan kaporit 10 ppm dan dinetralkan menggunakan thiosufat 5 ppm, lama sterilisasi min 24 jam. Sebelum ditebari bibit terlebih dahulu diberi pupuk Pertanian dengan dosis Urea 40 ppm, ZA 30 ppm, EDTA 0,5 - 1 ppm, FeCL3 0,5 - 1 ppm, TSP 20 ppm. Untuk species diatom pupuknya ditambah silikat. Perbandingan penggunaan bibit dan media adalah 3 :7
D. Identifikasi plankton
Identifikasi plankton (phytoplankton dan zooplankton menggunakan mikroskop, micropipet, hand counter, Haemocytometer danSedgwick-rafter, sampel yang datang ke Lab. Pakan Alami langsung dianalisa oleh analis
E. Pembuatan microalgae powder
Pembuatan mikroalgae powder dilakukan dengan cara memanen microalga dengan cara penyaringan atau pengendapan. Setelah disaring diletakkan kenampan untuk dikeringkan menggunakan oven (suhu tidak boleh lebih dari 600C) atau diangin-anginkan (tidak boleh terkena matahari langsung) agar sel tidak rusak. Setelah dikeringkan diblender dan diayak (mesh partikel powder microalgae sesuai kebutuhan).